Μελέτης της γονιδιακής έκφρασης στις γονάδες ψαριών του Παγασητικού Κόλπου
Resumen
Στην παρούσα εργασία επιδιώχθηκε μια απλή προσέγγιση της
μελέτης της διαφορικής γονιδιακής έκφρασης , απομονώνοντας το ολικό
m RNA , από τις αρσενικές και θηλυκές γονάδες συγκεκριμένων ειδών
ψαριών του Παγασητικού Κόλπου .
Για τον σκοπό αυτό χρησιμοποιήθηκε μια παραλλαγή της αρχικής
μεθόδου Differential Display , για την ταυτοποίηση και κλωνοποίηση όλων
των διαφορικά εκφρασμένων m RNAs που απομονώθηκαν από τα
δείγματά μας ,
Συγκεκριμένα εφαρμόστηκε η τροποποιημένη μέθοδος DD - PCR , η
οποία διαφοροποιείται στην χρήση απλού oligo ( d Τ ) εκκινητή στην
αντίστροφη μεταγραφή ( RT ) , στους τυχαίους εικοσιπενταμερείς και
εικοσιεξαμερείς εκκινητές σε συνδυασμό με τριαντακονταμερείς εκκινητές
στην αλυσιδωτή αντίδραση της πολυμεράσης ( PCR ) , στην αύξηση των
κύκλων της PCR , και τέλος στην χρώση της πηκτής πολυακρυλαμίδης με
νιτρικό άργυρο .
Η μέθοδος χρησιμοποιήθηκε στις γονάδες αρσενικών και θηλυκών
ατόμων ) της γόπας ( Boops boops ), του μπακαλιάρου ( Merlangius
merlangus ) και του κολιού ( Scomber japonicus ) με πολύ καλά
αποτελέσματα.
Επίσης αναλύθηκαν σε SDS - ηλεκτροφόρηση οι πρωτεΐνες του
κυτταροπλάσματος: και των πυρήνων των παραπάνω δειγμάτων και
βρέθηκαν χαρακτηριστικές πρωτεΐνες που διαφοροποιούν τα δείγματα
μεταξύ τους είτε αναφερόμαστε σε αρσενικές , είτε σε θηλυκές γονάδες
των ψαριών.
Academic publisher
Πανεπιστήμιο Θεσσαλίας. Σχολή Τεχνολογικών Επιστημών. Τμήμα Γεωπονίας Φυτικής και Ζωϊκής Παραγωγής.