Μελέτης της γονιδιακής έκφρασης στις γονάδες ψαριών του Παγασητικού Κόλπου
Öffnen
Autor
Ντάκης, ΔημήτριοςSupervisor name
Κουρέτας, Δημήτριος Δ.
Datum
2001Language
el
Access
free
Zusammenfassung
Στην παρούσα εργασία επιδιώχθηκε μια απλή προσέγγιση της
μελέτης της διαφορικής γονιδιακής έκφρασης , απομονώνοντας το ολικό
m RNA , από τις αρσενικές και θηλυκές γονάδες συγκεκριμένων ειδών
ψαριών του Παγασητικού Κόλπου .
Για τον σκοπό αυτό χρησιμοποιήθηκε μια παραλλαγή της αρχικής
μεθόδου Differential Display , για την ταυτοποίηση και κλωνοποίηση όλων
των διαφορικά εκφρασμένων m RNAs που απομονώθηκαν από τα
δείγματά μας ,
Συγκεκριμένα εφαρμόστηκε η τροποποιημένη μέθοδος DD - PCR , η
οποία διαφοροποιείται στην χρήση απλού oligo ( d Τ ) εκκινητή στην
αντίστροφη μεταγραφή ( RT ) , στους τυχαίους εικοσιπενταμερείς και
εικοσιεξαμερείς εκκινητές σε συνδυασμό με τριαντακονταμερείς εκκινητές
στην αλυσιδωτή αντίδραση της πολυμεράσης ( PCR ) , στην αύξηση των
κύκλων της PCR , και τέλος στην χρώση της πηκτής πολυακρυλαμίδης με
νιτρικό άργυρο .
Η μέθοδος χρησιμοποιήθηκε στις γονάδες αρσενικών και θηλυκών
ατόμων ) της γόπας ( Boops boops ), του μπακαλιάρου ( Merlangius
merlangus ) και του κολιού ( Scomber japonicus ) με πολύ καλά
αποτελέσματα.
Επίσης αναλύθηκαν σε SDS - ηλεκτροφόρηση οι πρωτεΐνες του
κυτταροπλάσματος: και των πυρήνων των παραπάνω δειγμάτων και
βρέθηκαν χαρακτηριστικές πρωτεΐνες που διαφοροποιούν τα δείγματα
μεταξύ τους είτε αναφερόμαστε σε αρσενικές , είτε σε θηλυκές γονάδες
των ψαριών.
Academic publisher
Πανεπιστήμιο Θεσσαλίας. Σχολή Τεχνολογικών Επιστημών. Τμήμα Γεωπονίας Φυτικής και Ζωϊκής Παραγωγής.