Τα επίπεδα της ρετινόλης και των ισομερών του ρετινοϊκού οξέος στον ορό ασθενών με χρόνια ιογενή ηπατίτιδα

Abstract

Η βιταμίνη Α στηρίζει σημαντικές βιολογικές δραστηριότητες του οργανισμού όπως την όραση, την αναπαραγωγή και την ακεραιότητα του αμυντικού συστήματος. Το ήπαρ είναι το κύριο όργανο, που εκτελεί το μεταβολισμό και την αποθήκευση της βιταμίνης Α και ταυτόχρονα αποτελεί στόχο μόλυνσης για του ιούς της ηπατίτιδας. Με σκοπό τη μελέτη των επιπέδων των ρετινοειδών της βιταμίνης Α σε περιπτώσεις ιικής ηπατίτιδας, αναπτύξαμε αρχικά μια μέθοδο διαχωρισμού και ποσοτικοποίησης του 13-cis ρετινοϊκού οξέος, του 9-cis ρετινοϊκού οξέος, του alltrans ρετινοϊκού οξέος και της ρετινόλης με τη χρήση της HPLC. Με τη μέθοδο αυτή επιτύχαμε το διαχωρισμό του 13-cis ρετινοϊκού οξέος, του 9-cis ρετινοϊκού οξέος, του all-trans ρετινοϊκού οξέος και της ρετινόλης σε χρόνους 15,073 min, 16,931 min, 18,273 min και 21,287 min αντίστοιχα. Έπειτα, αναλύσαμε 30 δείγματα ορού (με ποσοστό ανάκτησης 95±0.03% για τη ρετινόλη και 96 ± 0.02% για τα οξέα) ασθενών με ιικές ηπατίτιδες (μέσος όρος ηλικίας ασθενών 51,7±14,8) και 31 δείγματα ορού υγιών ατόμων-μαρτύρων (μέσος όρος ηλικίας 51,5±13,6) και τα συγκρίναμε μεταξύ τους. Από τα 30 δείγματα ασθενών οι 21 πάσχουν από ηπατίτιδα Β, οι 6 από ηπατίτιδα C, οι 2 από ηπατίτιδα B+C και 1 από ηπατίτιδα B+D. Μετά την ανάλυση των δειγμάτων ο μέσος όρος της συγκέντρωσης της ρετινόλης βρέθηκε στους μάρτυρες 406,1±126,78 ng/ml και στους ασθενείς 327,08±129,09 ng/ml, ο μέσος όρος της συγκέντρωσης του 13-cis ρετινοϊκού οξέος βρέθηκε στους μάρτυρες 2,23±0,72 ng/ml και στους ασθενείς 1,77±0,52 ng/ml και ο μέσος όρος του all trans ρετινοϊκού οξέος για τους ασθενείς βρέθηκε 1,44±0,33 ng/ml και για τους μάρτυρες 1,43±0,21 ng/ml. To 9-cis ρετινοϊκό οξύ δεν ήταν ανιχνεύσιμο στους ορούς. Τα δείγματα αξιολογήθηκαν στατιστικά με μη παραμετρικές μεθόδους. Οι δύο πληθυσμοί, των μαρτύρων και των ασθενών, για τη ρετινόλη βρέθηκαν διαφορετικοί σε επίπεδο στατιστικής σημαντικότητας 5% (ρ=0,02<0,05). Η παρούσα πειραματική μελέτη βρίσκεται σε εξέλιξη με σκοπό τη βελτιστοποίηση της απόδοσης και της ευαισθησίας της μεθόδου, για τη δυνατή και καλύτερη ανίχνευση των ρετινοϊκών οξέων και της ρετινόλης. Η βελτιστοποίηση της μεθόδου και η ανάλυση μεγαλύτερων σε αριθμό δειγμάτων που θα γίνει στο μέλλον, πιθανόν να επιτρέψουν τη σύγκριση των ρετινοϊκών οξέων και της ρετινόλης σε δείγματα ασθενών και μαρτύρων, ώστε να προκύψουν κάποια συμπεράσματα για τα επίπεδα της βιταμίνης Α σε περιπτώσεις ηπατοπάθειας.