Η οντογένεση της ελαφριάς αλυσίδας 2 (MLC2) της μυοσίνης στο τελεόστεο Sparus Aurata (L.) κατά την ανάπτυξη από την εκκόλαψη μέχρι και μετά την μεταμόρφωση

Abstract

Το παρών πείραμα περιγράφει την οντογένεση της ελαφριάς αλυσίδας 2 (MLC2) της μυοσίνης στα αναπτυξιακά στάδια της τσιπούρας από την εκκόλαψη (4 ημέρες) μέχρι και μετά την μεταμόρφωση (80 ημέρες). Η μελέτη της έκφρασης έγινε με εφαρμογή της υβριδοποίησης in situ στους κατάλληλα προετοιμασμένα ιστούς σε αντικειμενοφόρους πλάκες. Ο κλώνος για την δημιουργία του αντινοηματικού ριβοανιχνευτή απομονώθηκε από τα προνυμφικά στάδια του ιππόγλωσσου. Ο ριβοανιχνευτής της MLC2 δημιουργήθηκε με μετασχηματισμό από βακτήρια και σημάνθηκε με διγοξιγενίνη. Μετά την υβριδοποίηση του ριβοανιχνευτή με τον ιστό, το μόριο αναφοράς ανιχνεύθηκε ανοσοιστοχημικά. Η υβριδοποίηση in situ αποκάλυψε ότι το συγκεκριμένο μετάγραφο εκφράζεται μόνο στις άσπρες μυϊκές ίνες και ότι είναι μια εμβρυϊκή ισομορφή που προοδευτικά αντικαθίσταται από κάποια άλλη ενήλικη ισόμορφή μετά την μεταμόρφωση. Συγκεκριμένα, το πρότυπο έκφρασης ακολουθεί το πρότυπο της ανάπλασης των μυϊκών ινών: η MLC2 εκφράζεται στις νεοδημιουργηθέντες μυϊκές ίνες, η έκφραση είναι έντονη μέχρι το στάδιο της ολοκλήρωσης της σωμιτογέννεσης (στάδιο μεταμόρφωσης) και μετά εξασθενίζει.