Η οντογένεση της ελαφριάς αλυσίδας της μυοσίνης 1 (MLC1) στο σκελετικό μυ του τελεόστεου, Sparus aurata

Abstract

Η μυοσίνη, το κύριο συστατικό του μυός, είναι σύμπλοκο μορίων από βαριές και ελαφριές αλυσίδες, οι οποίες εμφανίζονται σε διαφορετικές ισομορφές και υπόκεινται σε συνεχή αντικατάσταση, η έκφραση των οποίων βρίσκεται υπό αναπτυξιακό και περιβαλλοντικό έλεγχο. Οι ισομορφές που εκφράζονται στα αρχικά αναπτυξιακά στάδια παρουσιάζουν ιδιαίτερο ενδιαφέρον, διότι μπορούν να προσφέρουν πληροφορίες για το σχηματισμό και τη λειτουργία του μυός, καθώς επίσης μπορούν να χρησιμεύσουν και ως δείκτες-μόρια για τη μελέτη διαφόρων γεγονότων κατά την εμβρυογένεση με σημαντική επίδραση στην ανάπτυξη και την αύξηση του μυός. Στην παρούσα μελέτη, μελετήθηκε το αναπτυξιακό πρότυπο έκφρασης της εμβρυϊκής ελαφριάς αλυσίδας της μυοσίνης 1 (MLC1) στην τσιπούρα με την τεχνική της υβριδοποίησης in situ. Η έκφρασή της μελετήθηκε σε εγκάρσιες τομές (5μπι) από δείγματα ολόκληρης προνύμφης που συλλέχθηκαν 4, 8, 10, 15, 20, 25, 34, 51, 80 ημέρες μετά την εκκόλαψη. Ο κλώνος, για τη σύνθεση του αντινοηματικού RNA ανιχνευτή που χρησιμοποιήθηκε, περιείχε το 91% της κωδικοποιούσας περιοχής της MLC1 του ιππόγλωσσου Hippoglossus hippoglossus L. Η έκφραση της MLC1 εντοπίστηκε αποκλειστικά και μόνο στο λευκό μυ και δεν ανιχνεύτηκε καθόλου στον κόκκινο μυ. Τη 4η ημέρα, η έκφραση ήταν έντονη και εξαπλώνονταν τόσο στους επαξόνιους όσο και στους υπαξόνιους μύες. Κατά την 8η ημέρα, παρατηρήθηκε μια αύξηση της διαμέτρου των μυϊκών ινών, ενδεικτική της υψηλής υπερτροφικής δραστηριότητας. Από τη 10η ημέρα και έπειτα, εμφανίστηκαν δύο διακριτά κέντρα πολλαπλασιασμού, στη ραχιαία και κοιλιακή πλευρά της προνύμφης. Τα κέντρα αυτά, χαρακτηρίζονταν από μυϊκές ίνες μικρής διαμέτρου, ενώ η διάμετρος των μυϊκών ινών αυξανόταν βαθμιαία από τα κέντρα πολλαπλασιασμού προς το οριζόντιο διάφραγμα. Την ίδια χρονική στιγμή, η έκφραση της MLC1 περιορίζεται στην περιφέρεια των ώριμων μυϊκών ινών. Αυτό το πρότυπο έκφρασης παρέμεινε αναλλοίωτο μέχρι την 51η ημέρα, όταν τα κέντρα πολλαπλασιασμού εξαφανίστηκαν και η έκφραση της MLC1 ανιχνεύτηκε μόνο σε κύτταρα τοποθετημένα ανάμεσα στις ώριμες μυϊκές ίνες, πιθανότατα δορυφορικά κύτταρα.