Κλωνοποίηση και έκφραση της a-synuclein120aaA53T στην ανθρώπινη νευροβλαστική κυτταρική σειρά SH-SY5Y

Abstract

Η νόσος του Πάρκινσον είναι μία από τις πιο κοινές νευροεκφυλιστικές ασθένειες και χαρακτηρίζεται από τρόμο, μυϊκή ακαμψία και βραδυκινησία. Μελέτες έχουν δείξει επιλεκτική απώλεια των ντοπαμινεργικών νευρώνων της μέλαινας ουσίας και των σχηματισμό κυτταρολασματικών εγκλείστων (σωμάτια Lewy) σε αυτούς. Οι φυσιολογικές αλλαγές και τα βιοχημικά μονοπάτια που εμπλέκονται στην επιλεκτική καταστροφή αυτών των νευρώνων παραμένουν ασαφείς. Η α-συνουκλεΐνη αποτελεί βασικό στοιχείο της παθολογίας της νόσου του Πάρκινσον. Η α-συνουκλεΐνη είναι μία μικρή διαλυτή πρωτεΐνη που εκφράζεται αρχικά στα προσυναπτικά άκρα των νευρώνων του κεντρικού νευρικού συστήματος. Η φυσιολογική λειτουργία της δεν είναι πλήρως κατανοητή, όμως πρόσφατες μελέτες υποθέτουν έναν ρόλο στην ρύθμιση της μεμβρανικής ευστάθειας και στην νευρωνική πλαστικότητα. Διάφοροι παράγοντες, περιβαλλοντικοί και γενετική, μπορεί να οδηγήσουν σε ένα μονοπάτι που εμπλέκει την μη σωστή αναδίπλωση της πρωτεΐνης ή την απώλεια λειτουργίας της. Ο τρόπος με τον οποίο μπορεί να συμβάλλει η α- συνουκλεΐνη στην αύξηση νευρωνικής τοξικότητας εμπλέκει διάφορα μονοπάτια όπως την συνάθροιση της ή την αλληλεπίδρασή της με άλλες πρωτεΐνες όπως την 14-3-3 chaperone ή άμεση αλληλεπίδραση με την ντοπαμίνη. Η εργασία αυτή αποσκοπεί στην κλωνοποίηση και έκφραση του γονιδίου της α-synl 20aaA53T, που κωδικοποιεί για την μεταλλαγμένη και με έλλειψη του C-τελικού άκρου α-συνουκλεΐνη, στα ανθρώπινα νευροβλαστικά κύτταρα SH-SY5Y.