Έκφραση του Β υποδοχέα των ενδοθηλίνων (EDNRB) σε προγεννητικά έμβρυα ποντικού

Abstract

Ο υποδοχέας Β των ενδοθηλινών (EDNRB) είναι ένας υποδοχέας επτά διαμεμβρανικών περιοχών που συνδέεται με G-πρωτε'ινες και παρουσιάζει την ίδια συγγένεια και για τα τρία μόρια προσδετών του (ΕΤ-1, ΕΤ-2, ΕΤ-3). Οι ενδοθηλίνες είναι πεπτίδια 21 αμινοξέων, με ποικίλες δράσεις στη φυσιολογία των λείων μυών. Πρόσφατες γενετικές μελέτες αποκάλυψαν τη λειτουργία αυτού του συστήματος στην ανάπτυξη και διαφοροποίηση των κυττάρων της νευρικής ακρολοφίας. Πιο συγκεκριμένα, η δέσμευση της ΕΤ-3 στον EDNRB διαδραματίζει σπουδαίο ρόλο στην ανάπτυξη δύο κυρίως κυτταρικών τύπων που προέρχονται από τα αρχέγονα κύτταρα της νευρικής ακρολοφίας: των κυττάρων του εντερικού νευρικού συστήματος και των μελανοκυττάρων. Για παράδειγμα, αρνητικές μεταλλάξεις στα γονίδια Et-3 (Is) και Ednrb (sl) στα ποντίκια προκαλούν έλλειψη νευρικών εντερικών γαγγλίων στο κόλον και έλλειψη χρωστικής στο μεγαλύτερο μέρος του δέρματος. Η ιατρική σημασία αυτού του φαινοτύπου τονίζεται από το γεγονός ότι παρόμοια προβλήματα συναντώνται σε μια σχετικά συχνή εκ γενετής ασθένεια (1: 5000), που ονομάζεται ασθένεια του Hirschsprung και χαρακτηρίζεται από απώλεια εντερικών νευρώνων στο οπίσθιο τμήμα του εντέρου. Σκοπός της παρούσας εργασίας ήταν η μελέτη της έκφρασης του EDNRB υποδοχέα σε έμβρυα ποντικού ηλικίας Ε10.5-Ε13.5 ημερών. Τα αναπτυξιακά αυτά στάδια αντιστοιχούν στις ηλικίες όπου, σύμφωνα με τα βιβλιογραφικά δεδομένα, πραγματοποιείται η μετανάστευση των κυττάρων της νευρικής ακρολοφίας προς τον εντερικό σωλήνα και την επιδερμίδα. Για το σκοπό αυτό χρησιμοποιήθηκαν ποντίκια, στα οποία εισήχθη το LacZ γονίδιο αναφοράς (μέσω ομόλογου ανασυνδυασμού) στο γενετικό τόπο του Ednrb. Στη συνέχεια, με χρήση ιστοχημικών τεχνικών προσδιορίστηκαν οι κυτταρικοί τύποι που εκφράζουν τον υποδοχέα EDNRB στο αναπτυσσόμενο έμβρυο. Παρατηρήθηκε έντονη έκφραση του υποδοχέα EDNRB από τα κύτταρα της νευρικής ακρολοφίας που μεταναστεύουν προς τον εντερικό σωλήνα και την επιδερμίδα, σε όλα τα αναπτυξιακά στάδια που μελετήθηκαν. Ωστόσο, μια πιο λεπτομερής μελέτη της έκφρασης του Ednrb γονιδίου στο έμβρυο ποντικού θα παρέχει χρήσιμες πληροφορίες και θα βοηθήσει στην κατανόηση της λειτουργίας του EDNRB/ΕΤ-3 μονοπατιού στη γενικότερη αναπτυξιακή πορεία του οργανισμού.