Ανίχνευση τεμαχιδίων του Tribolium confusum σε αμυλούχα προϊόντα με τη χρήση μοριακών δεικτών

Abstract

Στην παρούσα εργασία αξιολογήθηκε η αποτελεσματικότητα μιας νέας απλής μεθόδου ανίχνευσης τμημάτων εντόμου του είδους Tribollium confusum σε μοριακό επίπεδο με τη χρήση της PCR. μέθοδος αυτή, προέρχεται από συνδυασμό παλαιοτέρων μεθόδων ανίχνευσης που τροποποιήθηκαν ανάλογα με τις ανάγκες και τον εξοπλισμό του εργαστηρίου. Για το σκοπό αυτό, αρχικά, πραγματοποιήθηκε η εκτροφή του εντόμου στο εργαστήριο υπό συνθήκες δωματίου. Στη συνέχεια, έγινε η απομόνωση του DNA του εντόμου από τις αποικίες εκτροφής του εργαστηρίου ,για τη παραγωγή του θετικού μάρτυρα. απομόνωση του DNA βασίστηκε στο πρωτόκολλο των Doyle & Doyle (1990). Μετά την παραγωγή μπάντας στις 150 βάσεις με τη μέθοδο της PCR, ακόμα και σε αραιώσεις έως και 1/1000 που πραγματοποιήθηκαν στο γενετικό υλικό, ακολούθησαν επαληθεύσεις με ποσοστά σύμφωνα με το άρθρο του (White, 2007). Τέλος, μετά από δειγματοληψία μικρής ποσότητας αλεύρων από συσκευασίες του εμπορίου, έγινε προσπάθεια ανίχνευσης τμημάτων εντόμων του είδους Τ. confusum σε αυτές. Γενικά, η αποτελεσματικότητα του πειράματος και της διαδικασίας που ακολουθήθηκε παρέμεινε αξιόπιστη, όμως σύμφωνα με τα δείγματα από τα άλευρα του εμπορίου κρίθηκε με μηδενικά αποτελέσματα, πράγμα που μπορεί να οφείλεται είτε στο μικρό αριθμό δειγμάτων που πραγματοποιήθηκαν ,είτε σε μη μόλυνση των αποθηκευμένων αυτών προϊόντων από το συγκεκριμένο είδος εντόμου.