Ο ρόλος του παράγοντα TFPI-2 (Tissue Factor Pathway Inhibitor-2) στη διεισδυτικότητα των γλοιωμάτων : πειραματική μελέτη

Abstract

Ο TFPI-2 (human Tissue Factor Pathway Inhibitor-2), είναι μια πρωτεάση σερίνης, αναστολέας τύπου kunitz, που αναστέλλει την πλασμίνη, την τρυψίνη, τη χυμοτρυψίνη, την καθεψίνη G και την καλλικρεΐνη αλλά όχι τον ενεργοποιητή του πλασμινογόνου τύπου ουροκινάσης (uPA), τον ενεργοποιητή του ιστικού πλασμινογόνου (tPA) και τη θρομβίνη. Από έρευνες που έγιναν στο εργαστήριό μας, προτάθηκε ότι, η έκφραση του TFPI-2 ελαττώνεται ή απουσιάζει, κατά την ανάπτυξη των γλοιωμάτων στον άνθρωπο. Για να ερευνήσουμε το ρόλο του TFPI-2 στη διεισδυτικότητα των όγκων εγκεφάλου, χρησιμοποιήσαμε 2 κυτταρικές σειρές: 1) κύτταρα πολύμορφου γλοιοβλαστώματος (SNB-19) και 2) κύτταρα γλοιώματος χαμηλού βαθμού κακοήθειας (Hs683), στις οποίες ενσωματώσαμε vector ικανό να εκφράζει συμπληρωματικό αντίγραφο του ολικού μήκους mRNA του TFPI-2, είτε σε sense (0.7 kb) ή σε antisense (1 kb) προσανατολισμό. Τα Hs683, είναι κύτταρα που παράγουν αυξημένες ποσότητες TFPI-2 πρωτεΐνης και mRNA, με μειωμένη διεισδυτική ικανότητα. Εν αντιθέσει, τα SNB-19 κύτταρα παρουσιάζουν έντονη διεισδυτική συμπεριφορά και αυξημένη ικανότητα ανάπτυξης όγκου αλλά παράγουν μικρές εώς αμελητέες ποσότητες TFPI-2 πρωτεΐνης και mRNA. Έχει βρεθεί ότι, η έκφραση του TFPI-2 είναι αντιστρόφως ανάλογη του βαθμού κακοήθειας άρα και διεισδυτικότητας του όγκου. Αυτό ισχύει για διάφορους όγκους και όχι αποκλειστικά και μόνο για τα γλοιώματα. Τόσο in vitro, με διάφορες τεχνικές, που αναλύονται στη συνέχεια σε κυτταρικό επίπεδο, όσο και in vivo, μετά από ενδοεγκεφαλική ένεση σε ποντίκια (nude mice), η μελέτη του παράγοντα TFPI-2, οδήγησε στο ίδιο αποτέλεσμα-συμπέρασμα. Αυτή είναι η πρώτη αναφορά, βάσει της οποίας η down και up regulation του TFPI-2, παίζει σημαντικό ρόλο στη διεισδυτική συμπεριφορά των ανθρωπίνων γλοιωμάτων, καθώς και στην κυτταρική επιβίωση αυτών (απόπτωση).