Ο ρόλος του COP9 Signalosome στην αποικοδόμηση πρωτεϊνών κατόπιν εντολής του γιββεριλλικού οξέος στο φυτό Arabidopsis thaliana

Abstract

To C0P9 signalosome (CSN) είναι ένα συντηρημένο πρώτεϊνικό σύμπλεγμα οκτώ υπομονάδων και εικάζεται πως ρυθμίζει θετικά την αποικοδόμηση πρωτεϊνών μέσω του 26S πρωτεοσώματος. To CSN έχει δειχθεί ότι αλληλεπιδρά με Ε3 λιγάσες της ουβικιτίνης που περιέχουν πρωτεΐνες cullin σε πολλούς ευκαρυωτικούς οργανισμούς. Στα φυτά έχει ήδη δειχθεί η αλληλεπίδραση του CSN με τρία διαφορετικά Ε3 ένζυμα, το SCFTIR1, το SCFC0I1 και το SCFUFO. Στόχος των πειραμάτων ήταν να συνδεθεί η λειτουργία του CSN με την SCFSLYl,pia Ε3 λιγάση που εμπλέκεται στην αποικοδόμηση των πρωτεϊνικών μεταγωγικών παραγόντων RGA KaL GAI downstream του γιββεριλλικού οξέος. Χρησιμοποιώντας την τεχνική του ανοσοφθορισμού και της μικροσκοπίας φθορισμού δείχθηκε ότ L οι πρωτεΐνες RGA και GAI συσσωρεύονται σε CSN μεταλλάγματα. Χαρακτηρίστηκαν επίσης διαγονιδιακές γραμμές φυτών που εξέφραζαν τη σεσημασμένη πρωτεΐνη ΗΑ- SLY1 για τη μελλοντική συγκατακρήμνιση των CSN-SCFSLY1. Χαρακτηρίστηκε μια γραμμή μάρτυρας για την παρακολούθηση της μεταγωγής του σήματος του γιββεριλλικού οξέος στα φυτά Arabidopsis thaliana και την αντίστοιχη συμπεριφορά των CSN μεταλλαγμάτων. Τέλος χαρακτηρίστηκαν γενετικά διασταυρώσεις φυτών που έγιναν με στόχο την δημιουργία τριπλών μεταλλαγμάτων CSN, RGA, GAI με στόχο τη διαλεύκανση των σχέσεων μεταξύ τους όσον αφορά την ανάπτυξη του φυτού.