Μελέτη της χρονικής κατανομής της απόπτωσης στο ηπατικό παρέγχυμα σηπτικών επιμύων

Abstract

Το ήπαρ αποτελεί ένα από τα σημαντικότερα όργανα του σώματος, εκτε- λώντας ένα μεγάλο μέρος απαραίτητων για τη φυσιολογική λειτουργία του οργανισμού διεργασιών. Η κατανόηση των μηχανισμών με τους οποίους επιδρά η απόπτωση στους κυτταρικούς πληθυσμούς του ήπατος, έχει αποτελέσει το αντικείμενο πολλών ερευνών, τα αποτελέσματα όμως είναι αντιφατικά και δεν εξηγούν τη γενική εικόνα του φαινομένου. Στην παρούσα μελέτη, εξετάζεται η χρονική κατανομή της απόπτωσης και της νέκρωσης, σε τέσσερεις κυρίους κυτταρικούς πληθυσμούς του ήπατος. Χρησιμοποιήθηκαν 35 αρσενικοί αρουραίοι Wistar, στους οποίους προκλήθηκε σήψη με τη μέθοδο της τρώσης και απολίνωσης του τυφλού (C.L.P. Cecal Ligation and Puncture). Τα ζώα θανατώθηκαν στις 6, 12, 24, 36, 48 και 60 ώρες μετά την πρόκληση σήψης. Το ήπαρ αφαιρέθηκε από 5 ζώα σε κάθε χρονική ομάδα, καθώς επίσης και από 5 ζώα στα οποία δεν είχε προκληθεί σήψη και τα οποία χρησιμοποιήθηκαν σαν ομάδα ελέγχου. Τα δείγματα ήπατος αποθηκεύτηκαν στους -80° C και κατά τη διάρκεια του πειράματος, ομογενοποιήθηκαν, επωάστηκαν με αντισώματα και φθορίζουσες χρωστικές και τέλος, η ένταση του φθορι- σμού μετρήθηκε στον κυτταρομετρητή ροής, με σκοπό να ανιχνευθούν οι μεταβολές της απόπτωσης και της νέκρωσης σε σχέση με τον χρόνο, στους εξής τύπους κυττάρων του ήπατος: ηπατοκύτταρα, μακροφάγα, κύτταρα Ito και ενδοθηλιακά κύτταρα. Τα αποτελέσματα των μετρήσεων δείχνουν ότι: 1) τα κύτταρα του ήπατος κατά τη σήψη οδηγούνται στο θάνατο κυρίως μέσω του μηχανισμού της απόπτωσης. 2) Τα ηπατοκύτταρα, είναι αυτά που προσεγγίζουν τη γενική εικόνα της απόπτωσης, η οποία αυξάνεται στις 6 ώρες μετά την πρόκληση σήψης και πέφτει σε χαμηλά επίπεδα στις 60 ώρες, καθώς επίσης και την γενική εικόνα της νέκρωσης του οργάνου, που εμφανίζει άνοδο στις 6 και 48 ώρες και πτώση στις 60 ώρες μετά την πρόκληση σήψης. 3) Η μεταβολή της απόπτωσης στους διάφορους κυτταρικούς πληθυσμούς είναι μικτή και αντικατοπτρίζει τις ξεχωριστές τους λειτουργίες.