Ο ρόλος της πενικιλλινοδεσμευτικής πρωτεΐνης στην έκφραση αντοχής στα Β-λακταμικά αντιβιοτικά
Προβολή/ Άνοιγμα
Συγγραφέας
Κουτρουμπέλη, Άννα Θ.Όνομα Επιβλέποντος
Μανιάτης, Αντώνιος Ν.
Ημερομηνία
2003Γλώσσα
el
Πρόσβαση
ελεύθερη
Επιτομή
ΣΚΟΠΟΣ: Η μελέτη του ρόλου της πενικιλλινοδεσμευτικής πρωτεΐνης PBP2a σε
κόκκους που εκφράζουν αντοχή στα β-λακταμικά αντιβιοτικά.
ΥΛΙΚΑ-ΜΕΘΟΑΟΣ: Κατά τη διάρκεια ενός έτους απομονώθηκαν 186 στελέχη
S.aureus στο Μικροβιολογικό Εργαστήριο του Πανεπιστημιακού Νοσοκομείου της
Λάρισας από τα οποία 53 εμφάνισαν αντοχή στην οξακιλλίνη μετά από έλεγχο αντοχής
στα αντιβιοτικά με τη μέθοδο διάχυσης των δίσκων {Kirby Bauer). Τα 53 αυτά στελέχη
αποτέλεσαν το υλικό της περαιτέρω έρευνας.Ακολούθως έγινε προσδιορισμός της
ελάχιστης ανασταλτικής πυκνότητας (MIC) στην οξακιλλίνη με τη μέθοδο των
αραιώσεων του αντιβιοτικού σε άγαρ.Προκειμένου να γίνει ανίχνευση των υπεύθυνων
για την αντοχή στη μεθικιλλίνη γονιδίων απομονώθηκε χρωμοσωμικό DNA από όλα τα
στελέχη.Η γονιδιακή ανάλυση πραγματοποιήθηκε με την εφαρμογή της αλυσιδωτής
αντίδρασης πολυμεράσης (Applied Biosystems PCR System 2400) και ηλεκτροφόρηση
(Pharmacia Biotech EPS 600) των προϊόντων αυτής.Για την ανίχνευση του γονιδίου
mecA χρησιμοποιήθηκαν 2 ζεύγη εκκινητών, Ρ1-Ρ3 και Ρ2-Ρ3, ενώ για την ανίχνευση της
ρυθμιστικής περιοχής mecI-mecRl χρησιμοποιήθηκε το ζεύγος των εκκινητών SA10-
8Α15.Τέλος έγινε ανίχνευση της πενικιλλινοδεσμευτικής πρωτεΐνης PBP2a με τη χρήση
μονοκλωνικού αντισώματος (MRSA Slidex Biomerieux).
ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ: Από τα 53 στελέχη S.aureus με αντοχή στην οξακιλλίνη τα 13
είχαν MIC από 0.5-256μ§/πι1 ενώ τα υπόλοιπα 40 είχαν ΜΚ>256μ£/ιυ1.Σε όλα τα
στελέχη ανιχνεύθηκε το γονίδιο mecA είτε άθικτο είτε με κάποια μεταβολή στις θέσεις
των εκκινητών που χρησιμοποιήθηκαν.!! ρυθμιστική περιοχή ανιχνεύθηκε σε 10 μόνο
στελέχη που εμφάνισαν υψηλή αντοχή.Όλα τα στελέχη έδωσαν θετική την
συγκολλητινοαντίδραση με το μονοκλωνικό αντίσωμα της PBP2a οπότε όλα εκφράζουν
την πρωτεΐνη αυτή.
ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑΤΑ: Η αντοχή στην οξακιλλίνη σχετίζεται σε μεγάλο ποσοστό με
την παρουσία του γονιδίου mecA.Η PBP2a ανιχνεύθηκε σε όλα τα στελέχη και η
έκφρασή της δεν επηρεαζόταν από την ύπαρξη της ρυθμιστικής περιοχής mecI-mecRl.
Ακαδημαϊκός Εκδότης
Πανεπιστήμιο Θεσσαλίας. Πρόγραμμα Σπουδών Επιλογής. Τμήμα Ιατρικής Βιοχημείας.